產(chǎn)品概述：
本試劑盒采用SDS 堿裂解法，結(jié)合DNA 制備膜選擇性吸附DNA。 同時(shí)采用特殊溶液（Buffer ETR） 有效去除內(nèi)毒素，可20 min內(nèi)從1-4 ml 細(xì)菌培養(yǎng)物中提取出多至30 μg高純度質(zhì)粒DNA，其內(nèi)毒素水平控制 在0.1 EU/μg 以下。
一、試劑盒組成、貯存、穩(wěn)定性
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Cat.No. |
UE-MN-FEP-50 |
UE-MN-FEP-150 |
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Kit size |
50 preps |
150 preps |
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Miniprep column |
100 |
300 |
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2 ml Collection tube |
100 |
300 |
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RNase A |
30 μl |
90 μl |
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Buffer S1A |
15 ml |
45 ml |
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Buffer S2A |
15 ml |
45 ml |
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Buffer S3K |
21 ml |
63 ml |
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Buffer W2B concentrate |
32 ml |
2×48 ml |
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Buffer B |
55 ml |
160 ml |
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Eluent A |
12 ml |
36 ml |
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Buffer ETR |
9 ml |
27 ml |
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Protocol manual |
1 |
1 |
RNase A：50 mg/ml，室溫可貯存6個(gè)月，長(zhǎng)期貯存于-20℃。
Buffer S1A：細(xì)菌懸浮液。加入RNase A 后，混合均勻，4℃貯存。
Buffer S2A：細(xì)菌裂解液（含 SDS/NaOH ），室溫密閉貯存。
Buffer S3K：中和液，室溫密閉貯存。
Buffer W2B concentrate：去鹽液。使用前，按試劑瓶上指定的體積加入無水乙醇（可用100%乙醇或95%乙醇）?；旌暇鶆?，室溫密閉貯存。
Buffer B：DNA結(jié)合溶液，室溫密閉貯存。
Eluent A：洗脫液。室溫密閉貯存。
Buffer ETR：內(nèi)毒素去除液。室溫密閉貯存。
二、注意事項(xiàng)
1. 細(xì)菌過量將影響細(xì)菌裂解、質(zhì)粒DNA 的釋放，導(dǎo)致內(nèi)毒素含量過高。
2. 步驟3和步驟4的操作必須溫和。劇烈搖晃將導(dǎo)致基因組 DNA 的污染。但混合必須充分，否則影響得率。
3. 使用前，檢查Buffer S2A是否出現(xiàn)沉淀，如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)于37℃溫浴加熱溶解并冷卻至室溫后使用。
4. Buffer S2A 、Buffer S3K和 Buffer B含刺激性化合物，操作時(shí)要戴乳膠手套和防護(hù)眼鏡，避免沾染皮膚、眼睛和衣物，謹(jǐn)防吸入口鼻。若沾染皮膚、眼睛時(shí)，要立即用大量清水或生理鹽水沖洗，必要時(shí)尋求醫(yī)療咨詢。
三、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備
1. 第一次使用前，RNase A 全部加入 Buffer S1A中，4℃貯存。
2. 第一次使用前，Buffer W2B concentrate 中加入指定體積的無水乙醇。
3. Eluent A在65℃預(yù)熱后使用，能提高質(zhì)粒得率。
4. Buffer ETR 使用前放到4℃預(yù)冷。
5. 準(zhǔn)備無核酸和核酸酶污染的Tip頭、離心管。
6. 準(zhǔn)備42℃水浴。
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