產(chǎn)品介紹

吖啶橙(acridine orange，AO)是一種常用熒光染料，該染料具有膜通透性，能透過細(xì)胞膜，使核DNA和RNA染色，其激發(fā)波長為488nm，吸收波長為515nm，吖啶橙可透過正常細(xì)胞膜，使細(xì)胞核呈綠色或黃綠色熒光。碘化丙啶 (Propidiumlodide，簡稱PI)Pi是一種溴化乙啶的類似物，能夠與DNA強力結(jié)合產(chǎn)生熒光，其激發(fā)和發(fā)射波長分別為535nm 和630nm，它在嵌入雙鏈DNA后激發(fā)呈現(xiàn)紅色熒光。PI無膜通透性，不能通過活細(xì)胞膜，但卻能穿過破損的死細(xì)胞膜而對核染色。

當(dāng)使用 AO/PI 混合物對細(xì)胞進(jìn)行染色時，在死細(xì)胞中，兩種染料都能穿透，但存在由于AO發(fā)射被PI吸收的熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)現(xiàn)象，導(dǎo)致僅能觀察到PI的熒光。因此，利用全自動細(xì)胞計數(shù)儀或熒光顯微鏡，可以在活細(xì)胞中觀察到AO的綠色熒光，而在死細(xì)胞中觀察到PI的紅色熒光。

應(yīng)用范圍

死、活細(xì)胞染色（動物）

產(chǎn)品貨號

A6201S、A6201L

規(guī)格

1 mL (100T)、5 mL (500T)

儲運條件

2~8°C避光保存6個月，長期不用可放-20°C避光保存。避免反復(fù)凍融；冰袋運輸。

產(chǎn)品特點

直觀性：AO/PI活死染色可以直接方便觀察細(xì)胞的存活狀態(tài)。

快速性：染色過程相對快速，能夠在短時間內(nèi)得到結(jié)果。

高靈敏度：AO/PI染料的靈敏度很高，可檢測到極少量細(xì)胞。

高特異性：AO/PI雙染法不會受到其他細(xì)胞結(jié)構(gòu)或成分產(chǎn)生干擾。

多樣性：可以根據(jù)實驗需求增加染色應(yīng)用場景和優(yōu)化實驗方法。

兼容性：與其他細(xì)胞生物學(xué)實驗技術(shù)兼容。

低毒性：染料對細(xì)胞毒性較低，對細(xì)胞無顯著影響。

產(chǎn)品參數(shù)

AO：Ex/Em：488/515 nm（結(jié)合DNA）

PI：Ex/Em：535/630 nm（結(jié)合DNA）

光譜圖：

注意事項

1. 操作過程中應(yīng)注意減少染液暴露于強光下的時間。

2. 含酚紅培養(yǎng)基對細(xì)胞活率檢測影響輕微，可直接吸取培養(yǎng)液檢測。

3. 染色時間可根據(jù)具體實驗調(diào)整，適當(dāng)增加染色時間以期達(dá)到最佳效果。

4. 染色熒光強度與細(xì)胞濃度相關(guān)，建議在最佳細(xì)胞濃度內(nèi)染色從而提高準(zhǔn)確性。

5. 染色效果與細(xì)胞計數(shù)儀參數(shù)、染液工作濃度、孵育溫度和時間、細(xì)胞類型和濃度等因素相關(guān)，可預(yù)先進(jìn)行適當(dāng)摸索和優(yōu)化，并且公司提供定制服務(wù)。

6. 吖啶橙和碘化丙錠有?定毒性，請穿實驗服并戴一次性手套操作。