本試劑盒適合從瓊脂糖凝膠中回收DNA（70 bp-10 kb），回收量多至8 μg，回收率為60~85%，瓊脂糖凝膠在溫和的緩沖液中熔化，其中保護(hù)劑能防止線狀DNA在高溫下降解，然后在結(jié)合緩沖液作用下使DNA選擇性的結(jié)合到膜上。純化的DNA純度高，并保持片段完整性和高生物活性，可直接用于連接、體外轉(zhuǎn)錄、PCR擴(kuò)增、測(cè)序、微注射等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

同時(shí)本試劑盒可以直接用于PCR產(chǎn)物、酶促反應(yīng)、測(cè)序反應(yīng)的反應(yīng)液中提取DNA（大于75 bp），提取多至8 μg，回收率為70~90%，純化的DNA不含引物、酶蛋白及單核苷酸。

一、 試劑盒組成、貯存、穩(wěn)定性

Buffer A：制備管活化處理液，室溫密閉貯存。

Buffer DE-A：凝膠熔化劑，含 DNA 保護(hù)劑，防止 DNA在高溫下降解。室溫密閉貯存。

Buffer PCR-B：結(jié)合液(促使大于 70 bp 的 DNA 片段選擇性結(jié)合到 DNA制備膜上)。室溫密閉貯存。

Buffer W2 concentrate：去鹽液，使用前，按試劑瓶上指定的體積加入無(wú)水乙醇(用100%乙醇或95%乙醇)，混合均勻，室溫密閉貯存。

Eluent：洗脫液，室溫密閉貯存。

二、注意事項(xiàng)

1. Buffer DE-A(含有β-巰基乙醇)、Buffer PCR-B 含刺激性化合物，操作時(shí)要戴乳膠手套和眼鏡，避免沾染皮膚、眼睛和衣服，謹(jǐn)防吸入口鼻。若沾染皮膚、眼睛時(shí)，要立即用大量清水或生理鹽水沖洗，必要時(shí)尋求醫(yī)療咨詢。

2. 在凝膠回收步驟2中，將凝膠切成細(xì)小的碎塊可大大縮短凝膠熔化時(shí)間(線型 DNA長(zhǎng)時(shí)間暴露在高溫條件下易于水解)，從而提高回收率。勿將含 DNA 的凝膠時(shí)間地暴露在紫外燈下，減少紫外線對(duì) DNA造成的損傷。

3. 在凝膠回收步驟3中，凝膠必須完全熔化，否則將嚴(yán)重影響 DNA 回收率。

4. 如果回收率較低，可在膠充分溶解后檢測(cè)pH值，如果pH大于7.5，可向含有DNA的膠溶液中加3M 醋酸鈉調(diào)節(jié)pH至4-6之間。

5. 將 Eluent 或去離子水加熱至65°C，有利于提高洗脫效率。

6. DNA分子呈酸性，建議在 2.5 mM Tris-HCl，pH 7.0-8.5 洗脫液中保存。

7. 回收率低建議：

1）混合液轉(zhuǎn)移至吸附柱可以放置2-5 min；

2）混合液過(guò)柱離心之后將濾液再次重復(fù)離心；

3）加熱洗脫液溫度；

4）洗脫液二次重復(fù)洗脫。

三、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備

1.  第一次使用前，Buffer W2 concentrate中加入指定體積的無(wú)水乙醇。

2.  準(zhǔn)備無(wú)核酸和核酸酶污染的Tip頭、離心管。

3.  準(zhǔn)備75°C水浴。