產(chǎn)品概述：
本試劑盒適合從PCR、酶促反應(yīng)、測序反應(yīng)的反應(yīng)液中提取多至8 μg DNA（大于75 bp）,回收率為70-90%。純化的DNA不含引物、酶蛋白及單核苷酸。
一、試劑盒組成、貯存、穩(wěn)定性
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Cat.No. |
UE-PCR-10 |
UE-PCR-50 |
UE-PCR-250 |
UE-PCR-500 |
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Kit size |
10 preps |
50 preps |
250 preps |
500 preps |
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Miniprep column C15 |
10 |
50 |
250 |
500 |
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2 ml Microfuge tube |
10 |
50 |
250 |
500 |
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1.5 ml Microfuge tube |
10 |
50 |
250 |
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Buffer A |
6 ml |
28 ml |
145 ml |
280 ml |
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Buffer PCR-A |
4 ml |
20 ml |
100 ml |
200 ml |
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Buffer W2 concentrate |
5 ml |
24 ml |
2×72 ml |
2×120 ml |
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Eluent |
1 ml |
5 ml |
25 ml |
50 ml |
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Protocol manual |
1 |
1 |
1 |
1 |
Buffer A：制備管活化處理液，室溫密閉貯存。
Buffer PCR-A：DNA結(jié)合溶液，室溫密閉貯存。
Buffer W2 concentrate：去鹽液。使用前，按試劑瓶上的指定體積加入無水乙醇（可用100%乙醇或95%無水乙醇）,混合均勻，室溫密閉貯存。
Eluent：洗脫液，室溫密閉貯存。
二、注意事項(xiàng)
1. Buffer PCR-A含刺激性化合物，操作時(shí)要戴乳膠手套和眼鏡，避免沾染皮膚、眼睛和衣服，謹(jǐn)防吸入口鼻。若沾染皮膚、眼睛時(shí)，要立即用大量清水或生理鹽水沖洗，必要時(shí)尋求醫(yī)療咨詢。
2. DNA分子呈酸性，建議在2.5 mM Tris-HCI，pH7.0-8.5洗脫液中保存。
3. 回收前核酸片段含量5-20 μg請選擇UE-MX-PCR，洗脫液體積添加50-100 μl。
4. 回收率低建議：
1）步驟2之后混合液轉(zhuǎn)移至吸附管可以放置2-5 min；
2）步驟2之后混合液過柱離心之后將濾液再次重復(fù)離心；
3）加熱洗脫液溫度；
4）洗脫液二次重復(fù)洗脫。
常見問題解答：
◆得率低或者得不到DNA
·Buffer W2中沒有加入乙醇
Buffer W2在使用之前必需加入100%或者95%的乙醇。
·不合適的洗脫液
DNA只能在低鹽和pH7.0的條件下有效的洗脫。應(yīng)使用試劑盒提供的洗脫液或者用水（pH7.0）洗脫。在65℃下預(yù)熱洗脫液可以提高洗脫效率。
·洗脫液體積不夠或者沒有浸潤膜
洗脫液應(yīng)加在制備膜的中央以確保其均勻的浸潤整個(gè)膜。
·采用不合適的負(fù)壓裝置
確保負(fù)壓保持在 -25至-30英尺汞柱。
◆DNA不能很好地用于下游實(shí)驗(yàn)
·洗脫時(shí)鹽濃度過高
確保在洗脫之前鹽分都被洗滌去除。正確使用Buffer W1，避免在管體上殘留。
·樣品上樣電泳時(shí)樣品跑出膠孔
洗脫液中殘留有乙醇（樣品會飄在瓊脂糖凝膠孔中）
仔細(xì)的操作說明書中的所有步驟以去除殘留的乙醇。
·洗脫液中含有引物二聚體
引物二聚體會影響后續(xù)的反應(yīng)，如測序。任何大于40bp的引物二聚體都將不會被完全去除。結(jié)合完后，用750ul鹽酸胍（35g鹽酸胍溶于100ml去離子水）洗滌UE PCR清潔制備管或者制備板，然后再接著進(jìn)行說明書中所述的洗滌洗脫步驟。
·洗脫液中含有變性的單鏈DNA，這在凝膠電泳中可見一條又小又淡又糊的條帶
洗脫后，將洗脫液在95℃中溫浴2min。在使用前冷卻至室溫。95℃溫浴2min后也可以在洗脫液中加入10 mM NaCl以促進(jìn)復(fù)性。
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