產(chǎn)品概述：
產(chǎn)品貨號(hào)
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貨號(hào) |
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
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Y6081S |
YF®350酪胺信號(hào)放大試劑盒，HRP-羊抗鼠IgG |
50 slides |
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Y6081L |
200 slides |
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Y6082S |
YF®350酪胺信號(hào)放大試劑盒，HRP-羊抗兔IgG |
50 slides |
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Y6082L |
200 slides |
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Y6083S |
YF®350酪胺信號(hào)放大試劑盒，HRP-鏈霉親和素 |
50 slides |
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Y6083L |
200 slides |
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Y6084S |
YF®488酪胺信號(hào)放大試劑盒，HRP-羊抗鼠IgG |
50 slides |
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Y6084L |
200 slides |
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Y6085S |
YF®488酪胺信號(hào)放大試劑盒，HRP-羊抗兔IgG |
50 slides |
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Y6085L |
200 slides |
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Y6086S |
YF®488酪胺信號(hào)放大試劑盒，HRP-鏈霉親和素 |
50 slides |
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Y6086L |
200 slides |
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Y6087S |
YF®555酪胺信號(hào)放大試劑盒，HRP-羊抗鼠IgG |
50 slides |
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Y6087L |
200 slides |
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Y6088S |
YF®555酪胺信號(hào)放大試劑盒，HRP-羊抗兔IgG |
50 slides |
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Y6088L |
200 slides |
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Y6089S |
YF®555酪胺信號(hào)放大試劑盒，HRP-鏈霉親和素 |
50 slides |
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Y6089L |
200 slides |
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Y6090S |
YF®594 酪胺信號(hào)放大試劑盒，HRP-羊抗鼠IgG |
50 slides |
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Y6090L |
200 slides |
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Y6091S |
YF®594 酪胺信號(hào)放大試劑盒，HRP-羊抗兔IgG |
50 slides |
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Y6091L |
200 slides |
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Y6092S |
YF®594 酪胺信號(hào)放大試劑盒，HRP-鏈霉親和素 |
50 slides |
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Y6092L |
200 slides |
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Y6093S |
YF®640 酪胺信號(hào)放大試劑盒，HRP-羊抗鼠IgG |
50 slides |
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Y6093L |
200 slides |
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Y6094S |
YF®640 酪胺信號(hào)放大試劑盒，HRP-羊抗兔IgG |
50 slides |
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Y6094L |
200 slides |
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Y6095S |
YF®640 酪胺信號(hào)放大試劑盒，HRP-鏈霉親和素 |
50 slides |
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Y6095L |
200 slides |
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Y6096S |
YF®680 酪胺信號(hào)放大試劑盒，HRP-羊抗鼠IgG |
50 slides |
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Y6096L |
200 slides |
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Y6097S |
YF®680 酪胺信號(hào)放大試劑盒，HRP-羊抗兔IgG |
50 slides |
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Y6097L |
200 slides |
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Y6098S |
YF®680 酪胺信號(hào)放大試劑盒，HRP-鏈霉親和素 |
50 slides |
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Y6098L |
200 slides |
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B6099S |
生物素酪胺信號(hào)放大試劑盒，HRP-羊抗鼠IgG |
50 slides |
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B6099L |
200 slides |
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B6100S |
生物素酪胺信號(hào)放大試劑盒，HRP-羊抗兔IgG |
50 slides |
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B6100L |
200 slides |
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B6101S |
生物素酪胺信號(hào)放大試劑盒，HRP-鏈霉親和素 |
50 slides |
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B6101L |
200 slides |
產(chǎn)品內(nèi)容
表1: 組分名稱、編號(hào)及體積
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組分編號(hào) |
組分名稱 |
組分體積 |
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50 slides |
200 slides |
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見(jiàn)表2 |
Tyramide Stock Solution, 200× |
25 μL |
100 μL |
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見(jiàn)表2 |
HRP-conjugated |
25 μL |
100 μL |
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60011 |
BSA |
0.5 g |
2 g |
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60012 |
1× Tyramide Amplification Buffer |
5 mL |
20 mL |
表2: 試劑盒組分編號(hào)
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標(biāo)記染料 |
Ex/Em |
HRP-conjugated |
YF®/Biotin Tyramide |
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Goat anti-mouse IgG |
Goat anti-rabbit IgG |
Streptavidin |
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YF®350 |
347/448 |
60008 |
60009 |
60010 |
60001 |
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YF®488 |
490/515 |
60008 |
60009 |
60010 |
60002 |
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YF®555 |
555/565 |
60008 |
60009 |
60010 |
60003 |
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YF®594 |
590/617 |
60008 |
60009 |
60010 |
60004 |
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YF®640 |
642/662 |
60008 |
60009 |
60010 |
60005 |
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YF®680 |
681/698 |
60008 |
60009 |
60010 |
60006 |
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Biotin（生物素） |
~ |
60008 |
60009 |
60010 |
60007 |
儲(chǔ)存條件
-20℃避光保存，有效期見(jiàn)外包裝。
產(chǎn)品介紹
酪胺信號(hào)放大技術(shù)（Tyramide Signal Amplification）又稱催化信號(hào)放大技術(shù)（Catalyzed Signal Amplification），是一類利用HRP對(duì)靶抗原進(jìn)行高密度原位標(biāo)記的酶學(xué)檢測(cè)方法，其不但可以用于IF/IHC的信號(hào)放大，亦可用于Elisa、ISH等檢測(cè)。
酪胺信號(hào)放大技術(shù)可以用于檢測(cè)用傳統(tǒng)方法無(wú)法檢出的低豐度靶標(biāo)。基于酪胺的信號(hào)放大技術(shù)能夠提供極強(qiáng)的靈敏度、檢測(cè)極微量的目的抗原。酪胺信號(hào)放大技術(shù)極大的降低抗體的用量，節(jié)約抗體。酪胺信號(hào)放大試劑盒可與傳統(tǒng)染色方法結(jié)合使用以多色成像，也可以順序進(jìn)行兩個(gè)或更多個(gè)酪胺反應(yīng)以標(biāo)記一個(gè)樣品上的不同靶標(biāo)。
注意事項(xiàng)
1. 使用前請(qǐng)將產(chǎn)品瞬時(shí)離心至管底，再進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2. 1×Tyramide Amplification Buffer首次使用后，建議小量分裝，-20℃保存，避免反復(fù)凍融。3. 與熒光二抗相比，Tyramide試劑盒顯示出更高的靈敏度和更強(qiáng)的信號(hào)，因此，實(shí)驗(yàn)時(shí)一抗的使用濃度較低，建議梯度設(shè)置一抗?jié)舛纫哉业阶罴褲舛取?/span>
4. 建議設(shè)置未孵育一抗的陰性對(duì)照，確保陰性對(duì)照在孵育和洗滌過(guò)程中沒(méi)有被陽(yáng)性樣品中的試劑交叉污染。對(duì)于組織樣品，建議對(duì)未染色的對(duì)照（不添加抗體或酪酰胺）進(jìn)行成像，確定組織是否有自發(fā)熒光，排除對(duì)背景的影響。
5. 建議使用5 μg/mL的HRP結(jié)合物，降低濃度可能會(huì)影響信號(hào)強(qiáng)度和靈敏度。
6. 建議1:200稀釋YF®/Biotin-Tyramide。較高的濃度可能會(huì)導(dǎo)致信號(hào)過(guò)強(qiáng)或背景高，建議從1:100到1:1000梯度稀釋。
7. 可依次使用多個(gè)YF®/Biotin-Tyramide來(lái)標(biāo)記同一樣品的不同靶標(biāo)，每次酪酰胺反應(yīng)后需進(jìn)行HRP淬滅或抗體剝離。
8. 多色標(biāo)記時(shí)，依據(jù)抗原密度不同選擇不同熒光素（低密度抗原選擇強(qiáng)染料；高密度抗原選擇較弱染料）。標(biāo)記順序?qū)ψ罱K標(biāo)記效果有一定影響，需自行摸索。
常見(jiàn)問(wèn)題解答：
◆什么是TSA技術(shù)？
TSA技術(shù)，即酪酰胺信號(hào)放大技術(shù)（Tyramide signal amplification, TSA）是一類利用辣根過(guò)氧化酶（HRP）對(duì)靶蛋白或核酸進(jìn)行高密度原位標(biāo)記的酶學(xué)檢測(cè)方法。
◆TSA試劑盒有哪些組分？
試劑盒固定組分BSA、1×Tyramide Amplification Buffer，可變組分Tyramide Stock Solution, 200×、HRP-conjugated secondary antibody。Tyramide Stock Solution, 200×可根據(jù)需求選擇不同波長(zhǎng)的YF/Biotin染料。HRP-conjugated secondary antibody可根據(jù)一抗在Goat anti-mouse IgG、Goat anti-rabbit IgG、Streptavidin中進(jìn)行三選一。
◆TSA試劑盒適用于哪些樣本？
TSA試劑盒適用于細(xì)胞、石蠟切片、冰凍切片樣本。
◆石蠟切片樣本進(jìn)行多色標(biāo)記的步驟？
每一輪標(biāo)記后執(zhí)行微波處理（抗原修復(fù)步驟）以去除抗體，再接下一輪的標(biāo)記，因此可選擇同種屬來(lái)源的一抗，二抗具有通用性。
◆細(xì)胞樣本可以用TSA技術(shù)進(jìn)行多色標(biāo)記嗎？
不推薦。若需要，建議使用細(xì)胞爬片或細(xì)胞涂片進(jìn)行，并且抗體剝離及抗原修復(fù)推薦使用商業(yè)化的抗體剝離液，盡管如此，經(jīng)過(guò)幾輪染色清洗后，細(xì)胞流失仍會(huì)較多，可能不利于后續(xù)結(jié)果的分析，具體可根據(jù)需求嘗試。
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