產(chǎn)品組分

儲存條件

-20℃避光存儲。有效期見外包裝。

光譜特性

PMA: Ex = 464 nm; Ex/Em = 510/610 nm (following photolysis and reaction with DNA/RNA)

產(chǎn)品介紹

PMA qPCR活菌檢測試劑盒為檢測細菌活性提供有效的手段，本試劑盒提供PMA染料和基于SYBR Green染料的qPCR混合液。染料的最佳用量和可處理的樣品數(shù)量可能因樣品類型而異。PMA是一種高親和性的DNA結(jié)合染料，尤其與雙鏈DNA，該染料本身具有微弱的熒光，但與核酸結(jié)合后可以發(fā)出更為明亮的熒光。PMA具有細胞膜不可滲透性，因此可選擇性地修飾膜受損的死細胞的DNA。PMA修飾的DNA經(jīng)藍光（~464 nm）光解后，PMA上的光反應(yīng)性疊氮基轉(zhuǎn)化為高反應(yīng)性氮烯自由基，與DNA結(jié)合位點附近的任何烴部分反應(yīng)形成穩(wěn)定的共價氮碳鍵，從而導(dǎo)致永久性DNA 修飾。該修飾過程會使DNA不溶，且在后期的基因組DNA提取過程中與細胞碎片一起丟失。殘留在溶液中未結(jié)合的PMA，在強光照射下與水分子反應(yīng)分解成無交聯(lián)活性的羥胺化合物，使其不能再共價結(jié)合DNA。基于PMA的這一特性，我司將PMA與qPCR技術(shù)相結(jié)合，形成一種新的檢測方法—PMA-qPCR，用于活細菌的篩選。目前該法已在多種細菌菌株以及酵母、真菌、病毒和寄生蟲中得到驗證。

復(fù)雜樣品的處理，如糞便或土壤，可能會需要優(yōu)化樣品稀釋度、染料濃度和光處理時間。稀釋樣品的處理，如水測試，可能需要在染料處理前進行過濾或濃縮。

注意事項

1. 使用前請將產(chǎn)品瞬時離心至管底，再進行后續(xù)實驗。

2. 試劑盒組分中含有熒光染料，使用及保存過程中注意避光。

3. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。