產品概述:
產品參數(shù)
外觀:黃色固體。DiO溶于無水乙醇、無水DMSO和無水DMF,在無水DMSO中的溶解度約為10 mg/mL。較難溶解時,可以適當加熱或者超聲處理。
Ex/Em (MeOH) = 484/501 nm
CAS號:34215-57-1
分子式:C53H85ClN2O6
分子量:881.7
分子結構圖:
儲存條件
4℃避光保存,有效期見外包裝。
產品介紹
DiO作為示蹤劑或長期示蹤劑,被廣泛用于正向或逆向的,活的或固定的神經等細胞或組織。DiO通常不會顯著影響細胞的生存力。DiO除了細胞膜熒光標記外,還可用于檢測細胞的融合和粘附,發(fā)育或移植過程中的細胞遷移,通過FRAP(光脫色熒光恢復技術)檢測脂在細胞膜上的擴散,檢測細胞毒性和標記脂蛋白等。
DiO染色后可進行多聚甲醛(不可使用甲醇等其他試劑)的固定,但不建議在染色后進行透化的過程。此外,在固定透化(室溫下用0.1% TritonX-100 透化)后,也可以很好地進行質膜染色。DiO染色強度通常低于DiI,有時在固定組織中會完全喪失。
以每次使用100 μL染色工作液,染色工作液濃度10 μM計算,10 mg配置為工作液大概可以用11341次。
注意事項
1. 使用前請將產品瞬時離心至管底,再進行后續(xù)實驗。
2. DiO染色固定的細胞或組織樣品時,通常使用配制在PBS中的4%多聚甲醛進行固定,使用其它不適當?shù)墓潭ㄒ簳е聼晒獗尘拜^高。
3. 熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
4. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
常見問題解答:
◆用PBS稀釋后的DiO工作液染色時出現(xiàn)聚沉現(xiàn)象,怎么處理?
因為這類細胞膜染料在水中的溶解性不好,建議用PBS稀釋時稍微加入一點DMSO有機溶劑,來增加其溶解度
◆固定后的細胞,可以用DiO進行染色嗎?
該類細胞膜染料可以染色固定后的細胞樣本,但如果固定過程中,細胞膜破損,會影響染色的效果
◆DiO也可以染色細胞內的細胞器膜嗎?
可以,因為DiO染色細胞膜是非特異性的,所以細胞器的膜也會被染上色,如果不想細胞器染色太明顯,可以減少孵育時間或者將染料濃度降低
◆細胞追蹤有很多產品,該如何選擇?
首先確定追蹤細胞的時間,然后考慮染料結合機制。
1.鈣黃綠素染料(C4041)標記均勻且對短期細胞遷移示蹤效果極佳,但也會被某些類型細胞迅速外排。
2.親脂性的花青素染料,如DiI(D4010),DIO(D4007),DiA(D4059),DiD(D4019),DiR(D4006)能標記細胞膜而不破壞其功能,并且能持續(xù)更長時間,但如果發(fā)生膜融合則可能會染上其他細胞。此外,它們還會在透化過程中丟失。
3.CellTracker染料(C4060)更有利于長期標記,其帶有溫和的氯甲基反應基團使之能夠與細胞組分共價結合。
4.CFDA SE(C4070)也能共價地結合于細胞組分。
在所有列出的試劑中,細胞內保留與否取決于細胞分裂的速率和細胞的固有特性(主動外排,膜和蛋白質的周轉率等)。其中共價結合試劑比非共價結合的試劑展現(xiàn)出更長的保留時間
使用本產品的文獻:
1.Overcoming the Reticuloendothelial System Barrier to Drug Delivery with a “Don’t-Eat-Us” Strategy
Yixuan Tang,Xiaoyou Wang,Jie Li,Yu Nie,Guojian Liao,Yang Yu,Chong Li
ACS NANO
應用方向:細胞膜染色
Yanhua Li,Xia Zhang,Xiuyan Wan,Xiaohan Liu,Wei Pan,Na Li,Bo Tang
Adv. Funct. Mater.
3.Curved Nanofiber Network Induces Cellular Bridge Formation to Promote Stem Cell Mechanotransduction
Qian Sun Fang Pei, Man Zhang, Bo Zhang, Ying Jin, Zhihe Zhao , Qiang Wei
Advanced Science
4.Enzyme-Dynamic Extracellular Vesicles for Metalloimmunotherapy of Malignant Pleural Effusions
- Jiexin Li,
- Ruiqi Yang,
- Fuqiang Dong,
- Qian Qiu,
- Zhen Jiang,
- He Ren,
- Chen Zhang,
- Gengqi Liu,
- Jonathan F. Lovell, and Yumiao Zhang
1.Optimizing conditions and avoiding pitfalls for prolonged axonal tracing with carbocyanine dyes in fixed rat spinal cords
應用方向:標記示蹤
應用方向:細胞遷移
應用方向:細胞毒性
應用方向:標記的神經細胞外泌體
應用方向:用DiO進行外泌體染色,通過熒光的強弱對不同來源樣品中的外泌體進行定量分析







微信服務號