產(chǎn)品概述：
產(chǎn)品內(nèi)容
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組分 |
L6023S (30T) |
L6023M (150T) |
L6023L (300T) |
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A. Calcein AM (4 mM in anhydrous DMSO) |
10 μL |
50 μL |
100 μL |
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B. Ethidium homodimer-I (EthD-I) (2 mM in DMSO/H2O 1:4 (v/v)) |
30 μL |
150 μL |
300 μL |
注：本試劑盒次數(shù)是按照流式細(xì)胞儀一個(gè)樣品使用0.5 mL工作液規(guī)定的。
光譜信息
Calcein AM: Ex/Em = 494/517 nm；EthD-I: Ex/Em = 528/617 nm（結(jié)合DNA）。
儲(chǔ)存條件
-20?C避光保存。注意Calcein AM容易水解，需密封干燥保存，稀釋工作液需當(dāng)天配制。有效期見(jiàn)外包裝。
產(chǎn)品介紹
Live & DeadTM動(dòng)物細(xì)胞活力/毒性檢測(cè)試劑盒（Calcein AM, EthD-I）是一種為動(dòng)物細(xì)胞死活檢測(cè)提供雙熒光染色的試劑盒。試劑盒內(nèi)的兩種探針可分別測(cè)定細(xì)胞內(nèi)酯酶活性和質(zhì)膜完整性從而反映細(xì)胞活力。本試劑盒可用于熒光顯微鏡、流式細(xì)胞儀、酶標(biāo)儀以及其他熒光檢測(cè)系統(tǒng)。
本試劑盒可以應(yīng)用于大多數(shù)的真核哺乳動(dòng)物細(xì)胞，包括貼壁細(xì)胞核的某些組織，但不適用于真菌和酵母。該試劑盒與相同用處的臺(tái)盼藍(lán)相比，更快捷安全且靈敏度更高。
注意事項(xiàng)
1. 使用前請(qǐng)將產(chǎn)品瞬時(shí)離心至管底，再進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2. 酚紅或血清對(duì)于本試劑盒的檢測(cè)有一定的干擾。
3. 熒光染料均存在淬滅問(wèn)題，實(shí)驗(yàn)操作時(shí)請(qǐng)盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。
4. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
常見(jiàn)問(wèn)題解答：
◆你們家有兩款哺乳動(dòng)物死活染色試劑盒，分別是Calcein AM，PI（貨號(hào)L6037）與Calcein AM，EthD-1（貨號(hào)L6023，這兩者的區(qū)別是什么？
EthD-1相較于PI來(lái)說(shuō)，對(duì)DNA的親和力更高，低濃度下即可滿(mǎn)足染色效果。
◆我如何為L(zhǎng)IVE/DEAD細(xì)胞活力實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備死細(xì)胞對(duì)照？
有兩種簡(jiǎn)單的方法。一種是通過(guò)60°C放置20分鐘熱滅活細(xì)胞。第二種是將細(xì)胞放入70%乙醇。乙醇固定的細(xì)胞可以在冰箱中無(wú)限期儲(chǔ)存直到使用，可達(dá)好幾年。
步驟：
a.離心細(xì)胞、使細(xì)胞沉淀并去除上清
b.固定細(xì)胞：在15mL含有細(xì)胞團(tuán)的試管中加入10 mL70%冰乙醇，先開(kāi)始逐滴加入后震蕩，混合均勻。
c.在冰箱中儲(chǔ)存直到使用。
d.快使用時(shí)，水洗兩次且在選擇的緩沖液中重懸。
◆用該試劑盒染色后，可以進(jìn)行后續(xù)固定步驟嗎？
染色后不可以進(jìn)行固定步驟。PI作為膜非透性染料，固定后將轉(zhuǎn)移到所有細(xì)胞，不再維持死細(xì)胞特異性染色。
使用本產(chǎn)品的文獻(xiàn)：
1.Regional and sustained dual-release of growth factors from biomimetic tri-layered scaffolds for the repair of large-scale osteochondral defects
Yunsheng Dong，Xun Sun，Zhiling Zhang，Yufei Liu，Lin Zhang，Xiangyun Zhang，Ying Huang，Yanhong Zhao，Chunxiao Qi，Adam C.Midgley，Shufang Wang，Qiang Yang
Applied materials today（Volume 19, June 2020, 100548）
應(yīng)用方向：仿生三層支架上hUCMSCs細(xì)胞死活染色
2.PEG Linker Improves Antitumor Efficacy and Safety of Affibody-Based Drug Conjugates
Qiyu Li,Wenjing Li,Keyuan Xu,Yutong Xing,Haobo Shi,Zhe Jing,Shuang Li，Zhangyong Hong
International Journal of Molecular Sciences
3.Multifunctional Injectable Hydrogel Loaded with Cerium-Containing Bioactive Glass Nanoparticles for Diabetic Wound Healing
Yue-Hua Chen,Zhou-Feng Rao,Yu-Jie Liu,Xiang-Sheng Liu,Yu-Fei Liu,Lan-Ju Xu,Ze-Qi Wang,Jing-Yue Guo,Lin Zhang,Yun-Sheng Dong,Chun-Xiao Qi,Chao Yang,Shu-Fang Wang
Biomolecules 2021, 11(5), 702
4.Impact of an engineered micro-patterned interface on chitosan/glycerol membranes for wound healing
Author links open overlay panelJunjieCai，BoLiu，WeiLiu，LinaLiu，ZheFan
Surfaces and Interfaces
Chun Liu, Su Ni, Xiaoyu Wu, Linxiang Zhang, Ting Dai, Aiqin Wang, Hongbin Zhao
參考文獻(xiàn):
1.Visualization of keratocytes in the human cornea with fluorescence microscopy
應(yīng)用方向：角膜組織切片染色
2.Effect of matrix metalloproteinases activity on outflow in perfused human organ culture
應(yīng)用方向：死活細(xì)胞染色:評(píng)估培養(yǎng)物生存力
3.Metabolizing enzyme toxicology assay chip (MetaChip) for high-throughput microscale toxicity analyses
應(yīng)用方向：死活細(xì)胞染色:高通量微量毒性分析
4.Quantification of effector/target conjugation involving natural killer (NK) or lymphokine activated killer (LAK) cells by two-color flow cytometry
應(yīng)用方向：流式細(xì)胞儀分析死活細(xì)胞能力
5.Nanoclay Reinforced Integrated Scaffold for Dual-Lineage Regeneration of Cartilage and Subchondral Bone
Xueling Yin, Wanting Xia, Huimin Fan, Xiaoyu Yang, Kaiwen Xiang, Ye Ren and Zhihong Zhu
6.Strontium-Modified porous attapulgite composite hydrogel scaffold with advanced angiogenic and osteogenic potential for bone defect repair
Chun Liu,Su Ni,Xiaoyu Wu,Linxiang Zhang,Ting Dai,Aiqin Wang,Hongbin Zhao
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