產(chǎn)品概述:
產(chǎn)品介紹
Hoechst 33258,也稱bis Benzimide H 33258或HOE 33258,是一種非嵌入性的亮藍(lán)色熒光染料,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞成像技術(shù)中 DNA 和細(xì)胞核染色。其檢測機(jī)制為:Hoechst 33258可穿透細(xì)胞膜,與雙鏈DNA(dsDNA)中腺嘌呤-胸腺嘧啶(A-T)堿基對的小溝區(qū)域特異性結(jié)合,進(jìn)而實(shí)現(xiàn)細(xì)胞核的精準(zhǔn)標(biāo)記。該染料自身熒光背景微弱,與dsDNA結(jié)合后會顯著增強(qiáng)熒光強(qiáng)度,發(fā)出明亮的藍(lán)色熒光。
本產(chǎn)品可廣泛應(yīng)用于活細(xì)胞、固定細(xì)胞、組織樣本及石蠟切片的細(xì)胞核染色,同時(shí)可用于細(xì)胞凋亡檢測與細(xì)胞周期分析實(shí)驗(yàn),染色結(jié)束后可通過熒光顯微鏡觀察樣本形態(tài),或借助流式細(xì)胞儀進(jìn)行定量檢測分析。需重點(diǎn)說明的是:Hoechst 33258對活細(xì)胞的細(xì)胞膜滲透性較弱,因此對健康的活細(xì)胞染色時(shí)的熒光信號較弱;而對于凋亡細(xì)胞或細(xì)胞膜已受損的細(xì)胞,可呈現(xiàn)出明亮的藍(lán)色熒光。若實(shí)驗(yàn)需對健康活細(xì)胞實(shí)現(xiàn)高亮度藍(lán)色熒光染色,推薦選用同系列的Hoechst 33342染料(H4047)。
以貼壁細(xì)胞(96孔板)舉例,每孔100 μL染色工作液,染色工作液濃度5 μg/mL計(jì)算,10 mg配置為工作液大概可以用于20000個孔的染色。
應(yīng)用范圍
核酸染色
產(chǎn)品貨號
H4046
儲運(yùn)條件
-20℃避光保存,有效期見外包裝;冰袋運(yùn)輸。
產(chǎn)品特點(diǎn)
穩(wěn)定性強(qiáng):熒光亮度強(qiáng)且染料與DNA結(jié)合后發(fā)光穩(wěn)定,持續(xù)時(shí)間長;
使用方便:可與我司其他產(chǎn)品搭配使用,方便靈活;
細(xì)胞毒性低:對活細(xì)胞毒性低。
產(chǎn)品組分
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組分 |
H4046 |
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Hoechst 33258 |
10 mg |
產(chǎn)品參數(shù)
外觀:白色/黃色/淡黃色固體
Ex/Em:352/461 nm(結(jié)合DNA)
Ex/Em:346/460 nm(未結(jié)合DNA)
CAS號:23491-45-4
分子式:C25H24N6O?3HCl
分子量:533.9
分子結(jié)構(gòu)圖:
光譜圖:
注意事項(xiàng)
1.使用前請將產(chǎn)品瞬時(shí)離心至管底,再進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn),一旦配成溶液,請分裝保存,避免反復(fù)凍融造成的產(chǎn)品失效。
2. Hoechst染料可以用于活細(xì)胞或者固定化細(xì)胞,并且經(jīng)常用來代替其它核酸染料如DAPI。Hoechst 33342與Hoechst 33258關(guān)鍵的不同點(diǎn)在于,Hoechst 33258的一端是羥基,羥基是個典型的“親水基團(tuán)”,因此Hoechst 33258的親水性更強(qiáng),較難透過完整的細(xì)胞膜,通常對于死細(xì)胞的染色要比活細(xì)胞染色亮度高,因此多用于固定細(xì)胞染色。
3. Hoechst 33258溶于水,溶解度可達(dá)10mg/mL,用于細(xì)胞核染色時(shí),推薦的Hoechst 33258工作濃度為0.5~10 μg/mL,客戶可根據(jù)實(shí)際染色情況對染色液濃度及染色時(shí)間進(jìn)行調(diào)整。
4. 熒光染料都存在淬滅的問題,建議細(xì)胞或組織染色后立即觀察。
5. 本產(chǎn)品僅限于科研,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。
6. 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
常見問題解答:
◆Hoechst 33258和Hoechst 33342有什么區(qū)別嗎?
對于活細(xì)胞的染色,Hoechst 33342的膜通透性更好一些,對于固定樣品的染色,二者染色效果沒有差異。
◆固定液如何配制?
可以用4%的多聚甲醛進(jìn)行固定。
使用本產(chǎn)品的文獻(xiàn):
參考文獻(xiàn)
1.Hoechst 33258 staining for detecting mycoplasma contamination in cell cultures: a method for reducing fluorescence photobleaching
應(yīng)用方向:檢測細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染
2.A rapid method for accurate DNA measurements in single cells in situ using a simple microfluorimeter and Hoechst 33258 as a quantitative fluorochrome
應(yīng)用方向:對單個細(xì)胞精確的DNA定量
3.Fluorometric assay of DNA in cartilage explants using Hoechst 33258
應(yīng)用方向:DNA含量測定
4.Use of Merocyanine 540 and Hoechst 33258 for the selective killing of contaminating mycoplasmas in cell cultures
應(yīng)用方向:與Merocyanine 540聯(lián)用,選擇性殺滅支原體
5.Combined use of fluorescent peanut agglutinin lectin and Hoechst 33258 to monitor the acrosomal status and vitality of human spermatozoa
應(yīng)用方向:監(jiān)測人精子頂體狀態(tài)和活力
6.2′‐Deoxyadenosine Induces Apoptosis in Rat Chromaffin Cells
應(yīng)用方向:觀察細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特征
7.A novel, sensitive fluorometric staining techniqUE for the detection of DNA in RNA preparations
應(yīng)用方向:瓊脂糖凝膠電泳中DNA的檢測
8.Automated determination of DNA using the fluorochrome Hoechst 33258
應(yīng)用方向:DNA濃度
9.A simple DNA-dependent fluorescence enhancement assay for cell number
應(yīng)用方向:細(xì)胞計(jì)數(shù)
10.Chromosome sorting and DNA seqUEnce localization
應(yīng)用方向:染色體分選
11.Fluorometric Properties of the Bibenzimidazole Derivative Hoechst 33258, a Fluorescent Probe Specific for AT Concentration in Chromosomal DNA
應(yīng)用方向:染色體Q帶的識別
12.12/15-lipoxygenase translocation enhances site-specific actin polymerization in macrophages phagocytosing apoptotic cells
應(yīng)用方向:細(xì)胞核染色







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